電泳法,是指帶電荷的供試品(蛋白質、核苷酸等)在惰性支持介質(如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等)中,於(yu) 電場的作用下,向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動,使組分分離成狹窄的區帶,用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。
電泳技術的基本原理和分類
在電場中,推動帶電質點運動的力(F)等於(yu) 質點所帶淨電荷量(Q)與(yu) 電場強度(E)的乘積。F=QE質點的前移同樣要受到阻力(F)的影響,對於(yu) 一個(ge) 球形質點,服從(cong) Stoke定律,即:F′=6πrην式中r為(wei) 質點半徑,η為(wei) 介質粘度,ν為(wei) 質點移動速度,當質點在電場中作穩定運動時:F=F′即QE=6πrην
可見,球形質點的遷移率,首先取決(jue) 於(yu) 自身狀態,即與(yu) 所帶電量成正比,與(yu) 其半徑及介質粘度成反比。除了自身狀態的因素外,電泳體(ti) 係中其它因素也影響質點的電泳遷移率。
電泳法可分為(wei) 自由電泳(無支持體(ti) )及區帶電泳(有支持體(ti) )兩(liang) 大類。前者包括Tise-leas式微量電泳、顯微電泳、等電聚焦電泳、等速電泳及密度梯度電泳。區帶電泳則包括濾紙電泳(常壓及高壓)、薄層電泳(薄膜及薄板)、凝膠電泳(瓊脂、瓊脂糖、澱粉膠、聚丙烯酰胺凝膠)等。
自由電泳法的發展並不迅速,因為(wei) 其電泳儀(yi) 構造複雜、體(ti) 積龐大,操作要求嚴(yan) 格,價(jia) 格昂貴等。而區帶電泳可用各種類型的物質作支持體(ti) ,其應用比較廣泛。本節僅(jin) 對常用的幾種區帶電泳分別加以敘述。
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